【摘 要】
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研究了在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中calcineirin比活性测定的最佳条件.以RⅡ为底物,在测活缓冲液中,Ca2+和岗田酸(okadaic acid,OA)的加入是必须的,这与在脑组织中的测定是不
【机 构】
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北京师范大学生命科学学院北京市基因工程药物及生物技术重点实验室,
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研究了在人神经母细胞瘤株SH-SY5Y中calcineirin比活性测定的最佳条件.以RⅡ为底物,在测活缓冲液中,Ca2+和岗田酸(okadaic acid,OA)的加入是必须的,这与在脑组织中的测定是不一样的,同时进一步确定了需要加入的OA是100 nmol.L-1.在细胞破碎液中,calcineurin比活性的测定值是以缓冲液Ⅰ(含Ca2+与OA)中测得CN比活性数值减去缓冲液Ⅱ(含EGTA与OA)中所测比活性数值之差来表示.
The optimal conditions of calcineirin specific activity assay in human neuroblastoma SH-SY5Y were studied.It is necessary to add Ca2 + and okadaic acid (OA) to the assay buffer in the presence of RII as a substrate , Which is different from the measurement in brain tissue and further confirmed that the OA required to be added was 100 nmol.L <-1> In the cell disruption fluid, the calcineurin specific activity was measured as buffer I Ca2 + and OA) measured CN subtracted from the value of the ratio of activity measured in the buffer Ⅱ (including EGTA and OA) to represent the difference.
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