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目的
探讨低氧条件下人角膜上皮对棘阿米巴易感性的调控机制。
方法培养永生化人角膜上皮细胞(THCEs),随机分为低氧(1% O2)棘阿米巴刺激组和常氧(21% O2)棘阿米巴刺激组(1×106/ml)。收集刺激细胞检测Toll样受体4(TLR4)及其通路分子髓样分化因子88(MyD88)、核因子κB(NF-κB),以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)和干扰素β(IFN-β)mRNA的表达水平。同时检测TLR4、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达水平。收取上清检测相关炎性因子IL-8、TNF-α和IFN-β的表达水平。
结果低氧条件下棘阿米巴诱导的TLR4、MyD88、NF-κB、TNF-α、IFN-β及IL-8 mRNA表达相较常氧条件下分别下调47%、41%、45%、53%、36%及50%,细胞培养上清TNF-α、IFN-β及IL-8蛋白表达分别下调46%、28%及35%。同时,低氧明显抑制p-IκBα和p-ERK1/2蛋白表达(分别下调56%、55%),并促进IκBα的表达,与常氧棘阿米巴刺激组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。
结论低氧抑制人角膜上皮细胞对棘阿米巴刺激引起的炎性反应,该反应可能是通过抑制TLR4及其信号通路来完成的。