Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3基因的克隆与原核表达

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根据GenBank上登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ)基因组序列,设计一对特异性引物。通过RT—PCR的方法扩增DHV—T(A66株)VP3基因并将其5′端起始处稀有密码子同义突变。用限制性内切酶BamHⅠ/SalⅠ消化VP3基因片段和表达载体pGEX-6p—1后构建重组表达质粒pGEX—VP3,转化E.coli BL21(DE3)。经IPTG诱导后,SDS—PAGE分析表明,VP3基因在大肠埃希菌中大量表达,表达产物的分子质量约为52ku。Western blot检测表明,表达产物能与DHV—Ⅰ阳性血清
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