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目的
观察低氧条件下TRIM33基因表达的变化情况及对胶质瘤U251细胞生物学功能的影响。
方法将U251细胞分别在低氧及常氧条件下培养不同时间，采用实时荧光定量PCR及Western blot检测TRIM33的表达变化情况。通过构建TRIM33过表达慢病毒转染U251细胞，采用Western blot检测转染后U251细胞TRIM33的表达，低氧条件下利用CCK-8检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移及侵袭，Western blot检测上皮－间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。
结果(1)与常氧条件培养的U251细胞相比，低氧条件下U251细胞中的TRIM33表达发生下调(P<0.001)。(2)与空白对照组相比，TRIM33组的TRIM33相对表达水平明显升高(P<0.001)。(3)CCK-8实验表明，与空白对照组相比，TRIM33组的细胞增殖活力差异无统计学意义(P>0.05)。(4)Transwell实验结果显示，TRIM33组的迁移及侵袭能力较空白对照组明显降低(均P<0.05)。(5)Western blot结果显示，与空白对照组相比，EMT相关蛋白即波形蛋白、N-钙黏素表达水平均明显降低(均P<0.01)，E-钙黏素表达水平显著升高(P<0.001)。
结论在低氧条件下人脑胶质瘤U251细胞TRIM33表达发生下调，过表达TRIM33可以显著抑制低氧环境对U251细胞迁移、侵袭的影响，其可能是通过影响EMT实现的。TRIM33可作为拮抗低氧微环境的潜在基因治疗靶点。