酸碱处理对多孔钛成骨细胞增殖和分化的影响

来源 :中华口腔医学研究杂志(电子版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:lylingyunsnd
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目的研究酸碱处理对多孔钛表面小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖及分化的影响。方法粉末冶金法制备多孔钛,酸蚀处理后,NaOH浸泡不同时间,得到酸碱处理多孔钛(AAPT)。制备AAPT试件73个,未处理多孔钛(NTPT)试件41个和未处理致密钛(NTDT)试件30个。采用扫面电镜观察表面形貌,BCA法检测蛋白吸附能力,筛选适宜的碱处理时间。对于NTPT及AAPT组试件,采用表面接触角分析仪与拉曼光谱仪分析表面水接触角和化学组成。对于NTDT、NTPT及AAPT组试件,CCK-8法检测细胞增殖活性,实时荧光定量聚合酶链反应检测碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素(OCN)基因相对表达量。采用独立样本t检验和单因素方差分析进行统计分析,LSD-t检验进行两两比较。结果12 h NaOH处理组(AA12PT)纳米结构最为清晰,且蛋白吸附量(0.367 mg/ml)最高(F=400.835,P<0.05),因此采用该组进行后续实验。AA12PT组试件表面接触角(22.08°)显著小于NTPT组(93.7°),差异有统计学意义(F=1.194,P<0.001)。AA12PT组试件可见钛酸氢钠特征散射峰。接种3、5、7 d后,NTDT组的细胞增殖活性均高于AA12PT组(F3d=245.517、F5d=102.442、F7d=119.047,P<0.001),AA12PT组均高于NTPT组(P3d=0.005、P5d=0.038、P7d=0.010)。接种7 d后,AA12PT与NTPT组的ALP基因和OCN基因相对表达量均高于NTDT组(FALP=13.698,PALP-AA12PT<0.001、PALP-NTPT=0.002;FOCN=175.859,POCN<0.001)。接种14 d后,NTDT组的ALP基因及OCN基因相对表达量均高于NTPT组(FALP=33.691,PALP=0.045;FOCN=42.789,POCN=0.044)。结论酸碱处理可显著提高多孔钛材料的蛋白吸附量,促进成骨细胞的增殖、分化。
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