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目的构建新型血清miRNA提取方法,并评估血清外泌体miRNA-21表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)患者病理与临床特征的相关性。方法收集30例NSCLC患者(试验组)和10例健康志愿者(对照组)。从每例受试者外周血中离心出两份等量的外周血血清,设为A、B两组,每组为相同的40例血清标本。在miRNA提取方法方面,A组为直接从血清中提取miRNA-21,B组先富集血清外泌体,再从外泌体中提取miRNA-21,然后采用实时荧光定量PCR法分别检测A、B两组血清miRNA-21表达水平,通过分析两组血清中各自试验组、对照组的检测结果是否存在明显差异,来比较两种血清miRNA提取方法的优劣;并进一步分析血清外泌体miRNA-21表达水平与NSCLC患者病理分型、病理分期、TNM分期的相关性。结果 NSCLC患者血清外泌体中miRNA-21的表达水平较健康人明显上调(P<0.05),上调倍数为2.93倍,受试者工作曲线显示其预测NSCLC风险价值高,曲线下面积为0.867(P<0.05),95%CI为0.721～1.000;而通过直接从血清中提取miRNA-21的方法,NSCLC患者和健康人表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。NSCLC患者外泌体miRNA-21表达水平与病理分期、TNM分期相关(P<0.05),与病理分型无关(P>0.05)。结论血清外泌体miRNA-21表达水平具有更高的预测NSCLC风险的价值,并且与NSCLC病理分期、TNM分期相关。