豚鼠耳蜗内Corti氏器NOS免疫组织化学研究的体会

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内耳骨迷路埋藏在颞骨岩部内,对内耳的免疫组化研究技术关键在于脱钙, 既要制作出完整的耳蜗切片,又要保存抗原.特别是一氧化氮合酶(NOS)本身是一种蛋白质,更容易受温度和酸度的影响.本实验选用中性脱钙剂对内耳进行脱钙,改良石蜡包埋法进行石蜡包埋切片,取得了良好效果.现介绍如下:1.实验材料与方法:(1)取豚鼠10 只,快速断颈处死,沿外耳颞侧暴露出内耳,取出螺旋器,先从蜗底以5号针刺一小孔,再吸取适量的4%多聚甲醛固定液(用pH7.4的0.1M PB配制)自蜗顶注入膜蜗管内,将螺旋器放入4%多聚甲醛固定液内
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