【摘 要】
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将编码扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pPIC3.5K,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,通过橄榄油-MM平板及PCR方法筛选和鉴定重组子.
【基金项目】
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国家自然科学基金，福建省自然科学基金
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将编码扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pPIC3.5K,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,通过橄榄油-MM平板及PCR方法筛选和鉴定重组子.重组子发酵液经SDS-PAGE分析、橄榄油检验板鉴定,表明扩展青霉碱性脂肪酶基因在巴斯德毕赤酵母中获得了高效表达.表达蛋白分泌至培养基中,分子量约28kD,与扩展青霉碱性脂肪酶大小一致,占分泌蛋白的95%.橄榄油检验板检验表明该表达蛋白可分解橄榄油,通过优化该表达菌的发酵条件,以橄榄油为底物进行酶
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