【摘 要】
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目的 探究三七总皂苷对缺氧状态下视网膜神经节细胞凋亡的作用机制.方法 将细胞分为5组:对照组(细胞未处理组)、模型组(400μmol·L-1氯化钴作用24 h建立缺氧模型)和低、中、
【机 构】
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西南医科大学 附属医院 眼科,四川 泸州646000;西南医科大学 附属医院 风湿免疫科,四川 泸州646000;西南医科大学 心肌电生理研究室,四川 泸州646000
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目的 探究三七总皂苷对缺氧状态下视网膜神经节细胞凋亡的作用机制.方法 将细胞分为5组:对照组(细胞未处理组)、模型组(400μmol·L-1氯化钴作用24 h建立缺氧模型)和低、中、高3个剂量实验组(2,10,50μg·mL-1三七总皂苷预处理6 h后,加入400μmol·L-1氯化钴作用24 h).实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测检测细胞中JNK信号通路(磷酸化c-Jun氨基末端激酶,p-JNK;磷酸化c-jun,p-c-jun)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平(分别是2-ΔΔCt值和灰度值).结果 对照组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的细胞存活率分别是(100.00±2.68)％,(57.37±4.81)％,(62.70±2.21)％,(70.97±1.40)％和(85.30±3.96)％;这5组的凋亡率分别是(3.82±0.39)％,(28.25±2.56)％,(15.37±1.96)％,(12.49±3.21)％和(8.53±0.63)％;这5组的Bax蛋白表达水平分别是0.63±0.12,1.42±0.05,1.18±0.15,0.95±0.10和0.82±0.07;这5组的Caspase-3蛋白表达水平分别是0.55±0.05,1.54±0.13,1.24±0.10,0.99±0.10和0.70±0.09;这5组的Bcl-2蛋白表达水平分别是1.33±0.08,0.60±0.11,0.83±0.05,1.02±0.08和1.20±0.09;这5组的p-JNK蛋白相对表达量分别是0.62±0.08,1.34±0.09,1.22±0.07,1.00±0.05和0.80±0.08;这5组的p-c-jun蛋白相对表达量分别是0.45±0.12,1.48±0.23,1.17±0.55,1.07±0.26和0.85±0.11.基因结果的趋势与蛋白一致.对照组和低、中、高3个剂量实验组与模型组比较,以上指标差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 三七总皂苷可以通过抑制JNK信号通路对缺氧状态下视网膜神经节细胞有保护作用.
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