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[摘要] 目的：考察人参皂苷Rg1的溶血作用。方法：参照2010版《中国药典》中“溶血”检查法。结果：1％、2％、3％的人参皂苷Rg1对红细胞无溶血作用。结论：长期大剂量静脉给人参皂苷Rg1还需谨慎。
[关键词] 人参皂苷Rg1；体外溶血；血红素
[中图分类号]R965.2 [文献标识码]A [文章编号]1007—8517(2011)15—0049—01
人参皂苷Rgl(ginsenoside Rgl，GRgl)是人参三醇组皂苷的一个代表性单体，被认为是人参皂苷的代表性成分之一。现代药理学的研究表明：GRgl能够作用于机体多个系统，对心血管和血液系统、神经系统及免疫功能等具有广泛的药理作用，显示出“治疗原样药物”的优势，但口服生物利用度很低，只有1.9～20％。因此，扩展其给药途径就格外重要。本研究拟对其静脉注射给药后是否能引起溶血反应进行研究。
1、仪器
Agilent8453紫外一可见分光光度计(美国Agilent公司)。
2、试剂与动物
GRg1(吉林省宏久生物科技股份有限公司。批号：20040504；纯度：98.99％)。GRg1对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110703—200322)。肝素钠(生化试剂，中国上海惠兴生化试剂有限公司)。健康成年新西兰家兔，♀♂各半，体重2.50±0.5Kg。实验动物由中国药科大学动物中心提供，动物证号：SCXK(苏)2002-0011。
3、实验方法与结果
3.1 2％红细胞混悬液的制备
从家兔耳缘静脉取兔全血lOmL，放入盛有玻璃珠的锥形瓶中，玻璃珠和锥形瓶事先用1％肝素钠荡洗。将锥形瓶振摇10min，除去纤维蛋白原，使成脱纤血，加10倍量的生理盐水，摇匀，离心(3000rpm×15min)，除去上清液，沉淀的红血球再用生理盐水洗涤2～3次，直到上清液不显红色为止。将所得的红细胞用生理盐水配制成2％的混悬液(v/v)。
3.2 最大J吸收波长的确定
取新鲜蒸馏水2.5mL，加2％红细胞混悬液2.5mL，轻轻摇匀，37℃水浴保温1h，离心(3000rpm×15min)，上清液400～600nm扫描，测得最大吸收波长为576nm。
3.3 保温时间的确定
精密量取待测样品0.5mL，加0.9％氯化钠注射液2.0mL和2％红细胞混悬液2.5mL，混匀，于37±0.5℃分刖保温0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0h后，离心(3000rpm×15min)，取上清液于576nm波长处测定其吸收度(A)。结果表明37℃保温4h吸光度值可达到平衡。
3.4 GRg1溶血作用研究
吸取1％、2％、3％的GRgl的生理盐水溶液各0.5mL，分别置于离心管中，分别加0.9％氯化钠注射液2.0mL，作为试验管。另取新鲜蒸馏水2.5mL作阳性对照管，0.9％氯化钠注射液2.5mL作阴性对照管。上述各管分别加入2％红细胞混悬液2.5mL，轻轻摇匀，置37℃水浴中保温4h，取出。肉眼观察并记录其溶血情况。离心(3000rpm×15min)，吸取上清液，在576nm波长处测定各管溶液的吸光度。结果见图1。实验结果表明：1％、2％、3％的GRg1的生理盐水溶液无溶血作用。
4、讨论
4.1 本实验的原理是根据红细胞破裂释放出来的血红素在可见光波长段具有最大吸收的原理，采用分光光度法测定人参皂苷Rg1的溶血程度。
4.2 人参皂苷主要由原人参二醇皂苷、原人参三醇皂苷、齐墩果酸皂苷等三种皂苷构成。GRg1属于原人参三醇皂苷。原人参二醇皂苷具有抗溶血作用，原人参三醇皂苷具有溶血作用，因此人参总皂苷无溶血作用。本实验结果证明GRg1的溶血作用可能与剂量有关，1％、2％、3％的人参皂苷Rg1无溶血作用。本初步确定GRg1在特定浓度下不具有溶血作用，通过静脉注射给药物途径具有一定的可能性。
参考文献
[1]陈新梅，朱家壁，人参皂苷Rgl脂质体对东莨菪碱诱导大鼠学习记忆障碍的改善作用及其作用机制[J]，中国临床药理学与治疗学，2005，10(8):898—902
[2]王本祥，人参研究进展(1983－1988)[M]，第1版，天津：天津科学技术出版社，1991:1—2
[关键词] 人参皂苷Rg1；体外溶血；血红素
[中图分类号]R965.2 [文献标识码]A [文章编号]1007—8517(2011)15—0049—01
人参皂苷Rgl(ginsenoside Rgl，GRgl)是人参三醇组皂苷的一个代表性单体，被认为是人参皂苷的代表性成分之一。现代药理学的研究表明：GRgl能够作用于机体多个系统，对心血管和血液系统、神经系统及免疫功能等具有广泛的药理作用，显示出“治疗原样药物”的优势，但口服生物利用度很低，只有1.9～20％。因此，扩展其给药途径就格外重要。本研究拟对其静脉注射给药后是否能引起溶血反应进行研究。
1、仪器
Agilent8453紫外一可见分光光度计(美国Agilent公司)。
2、试剂与动物
GRg1(吉林省宏久生物科技股份有限公司。批号：20040504；纯度：98.99％)。GRg1对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110703—200322)。肝素钠(生化试剂，中国上海惠兴生化试剂有限公司)。健康成年新西兰家兔，♀♂各半，体重2.50±0.5Kg。实验动物由中国药科大学动物中心提供，动物证号：SCXK(苏)2002-0011。
3、实验方法与结果
3.1 2％红细胞混悬液的制备
从家兔耳缘静脉取兔全血lOmL，放入盛有玻璃珠的锥形瓶中，玻璃珠和锥形瓶事先用1％肝素钠荡洗。将锥形瓶振摇10min，除去纤维蛋白原，使成脱纤血，加10倍量的生理盐水，摇匀，离心(3000rpm×15min)，除去上清液，沉淀的红血球再用生理盐水洗涤2～3次，直到上清液不显红色为止。将所得的红细胞用生理盐水配制成2％的混悬液(v/v)。
3.2 最大J吸收波长的确定
取新鲜蒸馏水2.5mL，加2％红细胞混悬液2.5mL，轻轻摇匀，37℃水浴保温1h，离心(3000rpm×15min)，上清液400～600nm扫描，测得最大吸收波长为576nm。
3.3 保温时间的确定
精密量取待测样品0.5mL，加0.9％氯化钠注射液2.0mL和2％红细胞混悬液2.5mL，混匀，于37±0.5℃分刖保温0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0h后，离心(3000rpm×15min)，取上清液于576nm波长处测定其吸收度(A)。结果表明37℃保温4h吸光度值可达到平衡。
3.4 GRg1溶血作用研究
吸取1％、2％、3％的GRgl的生理盐水溶液各0.5mL，分别置于离心管中，分别加0.9％氯化钠注射液2.0mL，作为试验管。另取新鲜蒸馏水2.5mL作阳性对照管，0.9％氯化钠注射液2.5mL作阴性对照管。上述各管分别加入2％红细胞混悬液2.5mL，轻轻摇匀，置37℃水浴中保温4h，取出。肉眼观察并记录其溶血情况。离心(3000rpm×15min)，吸取上清液，在576nm波长处测定各管溶液的吸光度。结果见图1。实验结果表明：1％、2％、3％的GRg1的生理盐水溶液无溶血作用。
4、讨论
4.1 本实验的原理是根据红细胞破裂释放出来的血红素在可见光波长段具有最大吸收的原理，采用分光光度法测定人参皂苷Rg1的溶血程度。
4.2 人参皂苷主要由原人参二醇皂苷、原人参三醇皂苷、齐墩果酸皂苷等三种皂苷构成。GRg1属于原人参三醇皂苷。原人参二醇皂苷具有抗溶血作用，原人参三醇皂苷具有溶血作用，因此人参总皂苷无溶血作用。本实验结果证明GRg1的溶血作用可能与剂量有关，1％、2％、3％的人参皂苷Rg1无溶血作用。本初步确定GRg1在特定浓度下不具有溶血作用，通过静脉注射给药物途径具有一定的可能性。
参考文献
[1]陈新梅，朱家壁，人参皂苷Rgl脂质体对东莨菪碱诱导大鼠学习记忆障碍的改善作用及其作用机制[J]，中国临床药理学与治疗学，2005，10(8):898—902
[2]王本祥，人参研究进展(1983－1988)[M]，第1版，天津：天津科学技术出版社，1991:1—2