三结构域家族蛋白22在宫颈癌中的表达及其对高危型人乳头瘤病毒阳性宫颈癌细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

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[目的]探讨三结构域家族蛋白22(tripartite motif protein 22,TRIM22)在宫颈癌中的表达及其与临床病理学特征的关系,并分析TRIM22对高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)阳性宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响.[方法]收集2017年8月至2018年9月41例手术切除或活检的宫颈癌组织和18例正常子宫颈组织,分别提取总RNA和总蛋白.实时定量PCR分析TRIM22 mRNA表达,Western blot分析TRIM22蛋白水平,并分析TRIM22 mRNA表达变化与患者临床病理学特征的关系.以HPV16阳性宫颈癌细胞系CaSki和HPV18阳性宫颈癌细胞系HeLa为研究对象,用TRIM22表达质粒(pUNO1-hTRIM22a)和对照表达质粒(pUNO1)稳定转染CaSki细胞和HeLa细胞,以未转染细胞为对照组.实时定量PCR和Western blot检测转染后细胞中TRIM22 mRNA表达和蛋白水平.采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖;Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Western blot检测抗磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和磷酸化AKT (phosphorylated AKT,p-AKT)蛋白表达.[结果]TRIM22在宫颈癌组织中mRNA表达(0.99±0.16 vs 4.39±1.41,t=15.40,P<0.001)和蛋白水平(0.30±0.12 vs 1.32±0.27,t=19.97,P<0.001)均明显低于正常子宫颈组织,TRIM22在高危型HPV阳性宫颈癌组织中mRNA表达(0.94±0.14 vs 1.17±0.12,t=4.21,P<0.001)和蛋白水平(0.27±0.08 vs 0.43±0.18,t=-3.86,P<O.001)均明显低于高危型HPV阴性宫颈癌组织.TRIM22 mRNA表达与淋巴结转移明显相关(1.04±0.16 vs 0.89±0.13,t=-3.15,P=0.003),与肿瘤大小、临床分期无明显相关(P>0.05).pUNO1转染CaSki细胞和HeLa细胞与未转染细胞在TRIM22 mRNA和蛋白水平、细胞增殖、侵袭数、细胞周期、凋亡率、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达量的差异均无统计学意义(P>0.05),pUNO1-hTRIM22a转染后CaSki细胞和HeLa细胞中TRIM22 mRNA和蛋白水平显著性高于pUNO1组和对照组(P<0.001),细胞增殖、侵袭数量(CaSki细胞:31.00±5.30 vs 135.30±17.24 vs 120.40±22.95,F=56.01,P<0.001;HeLa细胞:27.20±9.04 vs 112.80±12.03 vs 117.00±18.56,F=67.45,P<0.001)、处于G2~M期的细胞比例(CaSki细胞:2.04%±0.36% vs 12.72%±1.98% vs 12.40%±1.62%,F=57.82,P<0.001;HeLa细胞:3.07%±1.08% vs 8.26%±2.98% vs 10.92%±3.56%,F=22.82,P<0.001)、PI3K、p-AKT蛋白表达量均显著性低于pUNO1转染细胞和未转染细胞,而凋亡率显著性高于pUNO1组和对照组(CaSki细胞:11.90%±2.78% vs 5.27% ±1.78% vs 6.64%±1.19%,F=16.78,P<0.001:HeLa细胞:18.79%±4.64% vs 6.78%±1.03% vs 5.23%±1.09%,F=27.91,P<0.001).[结论]TRIM22在宫颈癌中的表达明显减低,其表达水平与高危型HPV感染、转移恶化密切相关.上调TRIM22表达可明显减弱高危型HPV阳性宫颈癌细胞的增殖、侵袭能力,促进宫颈癌细胞凋亡.
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