【摘 要】
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目的 基于TGF-β/Smad信号通路探讨乌梅有机酸对高糖诱导心肌纤维化的保护作用.方法 体外培养新生大鼠心肌成纤维细胞,加入高糖诱导后,以0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mg/ml乌梅有机酸处理,采用CCK-8法检测各组细胞活力,得出IC50值,选出最佳药物浓度.取处于对数生长期的心肌成纤维细胞,随机分为对照组、高糖组、乌梅有机酸(2 mg/ml)组、TGF-β1(5 ng/ml)组、乌梅有机酸(2 mg/ml)+TGF-β1(5 ng/ml)组,药物处理后,通过CCK-8法检测细胞
【机 构】
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江汉大学附属医院,武汉市第六医院心血管内科,武汉430015
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目的 基于TGF-β/Smad信号通路探讨乌梅有机酸对高糖诱导心肌纤维化的保护作用.方法 体外培养新生大鼠心肌成纤维细胞,加入高糖诱导后,以0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mg/ml乌梅有机酸处理,采用CCK-8法检测各组细胞活力,得出IC50值,选出最佳药物浓度.取处于对数生长期的心肌成纤维细胞,随机分为对照组、高糖组、乌梅有机酸(2 mg/ml)组、TGF-β1(5 ng/ml)组、乌梅有机酸(2 mg/ml)+TGF-β1(5 ng/ml)组,药物处理后,通过CCK-8法检测细胞活力.通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-6水平及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原水平.通过蛋白免疫印迹法检测各组细胞TGF-β/Smad通路相关蛋白p-Smad3/Smad3、TGF-β1表达水平.结果 与对照组相比,高糖组细胞活力、TNF-α、IL-6、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原水平、TGF-β/Smad通路相关蛋白p-Smad3/Smad3、TGF-β1表达明显升高(P<0.05).与高糖组相比,乌梅有机酸组细胞活力、TNF-α、IL-6、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原水平、TGF-β/Smad通路相关蛋白p-Smad3/Smad3、TGF-β1表达降低(P<0.05);TGF-β1组细胞活力、TNF-α、IL-6、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原水平、TGF-β/Smad通路相关蛋白p-Smad3/Smad3、TGF-β1表达升高(P<0.05).与乌梅有机酸组相比,乌梅有机酸+TGF-β1组细胞活力、TNF-α、IL-6、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原水平、TGF-β/Smad通路相关蛋白p-Smad3/Smad3、TGF-β1表达升高(P<0.05).与TGF-β1组相比,乌梅有机酸+TGF-β1组细胞活力、TNF-α、IL-6、Ⅰ型胶原及Ⅲ型胶原水平、TGF-β/Smad通路相关蛋白p-Smad3/Smad3、TGF-β1表达降低(P<0.05).结论 乌梅有机酸可下调TGF-β/Smad信号通路蛋白,抑制心肌成纤维细胞增殖,降低高糖诱导的炎性因子及胶原蛋白表达,减轻心肌纤维化.
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