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优化了保健食品中维生素B1、B6、烟酸、烟酰胺和咖啡因同时测定的反向离子对色谱法。样品经简单提取后,以乙腈-1-辛烷磺酸钠-磷酸水溶液作流动相,进行梯度洗脱,二极管阵列检测器（DAD）双波长（260nm、290nm）检测。5种物质在较宽浓度范围内线性关系良好,检出限（S/N=3）分别在0.01～0.08mg.L-1之间,平均加标回收率为90.8%～99.0%,相对标准偏差（RSD）为1.06%～4.98%。该方法适用于保健食品中维生素B1、B6、烟酸、烟酰胺和咖啡因的同时测定。