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构建重组质粒SV40T/pcDNA3.1,为建立永生化肝细胞系奠定基础.pcD2质粒经BamH I单酶切获得SV40T基因片段,并将其插入pcDNA3.1载体,经酶切鉴定证实,SV40T基因片段已成功插入载体中,采用常规方法分离培养肝细胞,用SV40T单克隆抗体进行间接免疫荧光检测,验证其在肝细胞中的表达.