探讨PI3K/AKT信号通路对肝癌细胞MHCC-97H中CD90⁺干细胞比例及干细胞特性的影响。

流式细胞术检测MHCC-97H细胞中流式抗体标记的CD90⁺细胞含量。PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理MHCC-97H细胞后，用流式细胞术分析MHCC-97H细胞中的CD90⁺干样细胞含量的变化，Western blot检测其相关蛋白的表达。平板克隆形成实验检测LY294002对MHCC-97H细胞中CD90⁺亚群和CD90^-亚群克隆能力的影响。比较不同浓度梯度的CD90⁺亚群和CD90^-亚群在裸鼠皮下成瘤的能力，以及加入LY294002后成瘤能力的变化。免疫组织化学检测CD90⁺亚群和CD90^-亚群形成的瘤体中干细胞相关抗体CD90、SHP2及AKT和磷酸化-AKT (p-AKT)蛋白在加入抑制剂前后分别的变化情况。对数据进行ｔ检验。

MHCC-97H细胞中存在CD90⁺肝癌干样细胞，经过LY294002处理后，肝癌干样细胞比例由2.98%±0.08%下降为0.78%±0.08%（t = 33.680， P<0.01）。LY294002可以显著降低CD90⁺亚群的克隆能力，用药前后分别为95.13%±3.78%和61.82%±7.23％（t = 7.617，P<0.01）；对CD90^-亚群的克隆能力影响不明显。LY294002能降低CD90⁺亚群的成瘤能力和相关肝癌干细胞CD90、SHP2和p-AKT蛋白的表达水平，但对AKT蛋白表达水平影响不大；对CD90^-亚群影响不明显。

MHCC-97H细胞中的CD90⁺细胞具有干细胞特性，且依赖PI3K/AKT信号通路。