【摘 要】
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【目的】对重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET22b-β-ffase进行高密度发酵产β-呋喃果糖苷酶工艺研究。【方法】比较溶氧反馈补料和指数流加补料对重组菌发酵产酶的影响,对不同比生长
【基金项目】
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高等学校博士学科点专项基金-优先发展领域项目(No.20123221130001);国家自然科学基金项目(No.21506099);江苏省高校自然科学研究面上项目(No.15KJB530008)~~
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【目的】对重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET22b-β-ffase进行高密度发酵产β-呋喃果糖苷酶工艺研究。【方法】比较溶氧反馈补料和指数流加补料对重组菌发酵产酶的影响,对不同比生长速率和诱导时机进行优化。【结果】确定了双阶段指数流加过程中重组菌生长的比生长速率,分别控制诱导前期比生长速率为0.20 h-1,诱导后期比生长速率为0.13 h-1,诱导时机为指数中期。获得细胞干重约为51 g/L,最高酶活达到1.79×105 U/L,单位菌体产酶量为3 510 U/g,单位产酶速率达到3.58×104 U/(L·h),生物量、单位菌体产酶量和产酶速率分别是指数流加未优化前的1.8、1.7和3.0倍。【结论】双阶段指数流加补料工艺能有效提高β-呋喃果糖苷酶的产酶量,为β-呋喃果糖苷酶的进一步工业化奠定基础。
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