晚期糖基化终产物受体胞外段的原核表达及其相互作用蛋白的筛选

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目的构建晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation end—product,RAGE)胞外段基因的原核表达载体并诱导表达,应用噬菌体展示技术筛选其相互作用蛋白。方法用RT—PCR方法扩增人RAGE胞外段cDNA,构建于原核表达载体pET14b,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导RAGE胞外段融合蛋白表达,用Ni^2+-NTA亲和层析柱进行纯化并行Westernblot鉴定。以重组RAGE胞外段蛋白为靶分子,进行3轮噬菌体展示环七肽库的筛选,从第3轮洗脱物中随机挑选
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