利用高效液相色谱(HPLC)建立了定量检测发酵产物中麦角硫因的方法。该方法采用Zorbax SB-Aq色谱柱,检测条件为流动相A(纯水∶甲醇体积比99∶1,使用20%的乙酸和50%的氨水调节流动相的p H至5.0)和B(甲醇),进样量5μL,柱温30℃,流速0.7 m L/min,检测波长为257 nm。建立的梯度洗脱的模式进一步提高了方法的稳定性、延长了色谱柱的使用时间。经高效液相色谱(HPLC)和高效液相色谱质谱联用仪(HPLC-MS)验证,该方法特异性良好,检出限和定量限分别为0.045和0.900μg/L。在2.5~1000 mg/L的浓度范围内,线性关系良好,相关系数R2=0.9991。精密性、日内稳定性和日间稳定性的RSD分别为0.33%、1.89%和0.026%。平均加标回收率在92.17%和93.92%之间。该方法简便、迅速、稳定、准确,可以用于麦角硫因的研发以及应用的定量分析。