半定量RT—PCR法评定不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达差异

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gouhs

【摘要】

：

根据已报道的猪抗菌肽pr-39基因和看家基因β-肌动蛋白(β-actin)基因序列，分别设计pr-39和β-actin的引物，探讨了PCR体系中适宜的MgCl2浓度、循环次数，以及2对引物间竞争情况。

【作者】

：

汪以真林文学许梓荣

【机构】

：

浙江大学饲料科学研究所

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

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2004年1期

【关键词】

：

半定量RT-PCR 猪抗菌肽 pr-39 基因表达 semi-quantitative RT-PCRpigantibacterial peptidepr-39

【基金项目】

：

国家自然科学基金(No.30040036),,浙江省人才培养专项基金(No.RC01053)

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根据已报道的猪抗菌肽pr-39基因和看家基因β-肌动蛋白(β-actin)基因序列，分别设计pr-39和β-actin的引物，探讨了PCR体系中适宜的MgCl2浓度、循环次数，以及2对引物间竞争情况。实验揭示，要保证半定量RT-PCR的可行性与可靠性，适宜的MgCl2浓度为2．5mmol／L，循环次数为29；由于2对引物之间的杂交配对，两对引物需分别进行扩增。根据以上信息构建一优化的半定量RT—PCR法，以β-actin为内标，研究不同生长阶段猪抗菌肽pr-39基因表达的差异。结果显示，不同生长阶段猪pr

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