重组大肠杆菌产脂肪氧合酶发酵条件优化

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为进一步提高重组大肠杆菌(pET-23a-pse-LOX)产脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX)的酶活力,利用响应面法对其发酵条件进行优化。通过单因素试验确定诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间、诱导温度、接种量、培养基初始pH值和装液量对其发酵产酶的影响。在此基础上,采用Plackett-Burman试验设计从7个因素中筛选出对LOX产量具有显著效应的因素为诱导时机、诱导时间和培养基初始pH值,并利用Box-Behnken试验设计和响应曲面法分析以确定其产酶的最优发酵条件,即诱导时机为菌液OD600nm达到1.6、诱导时间34h、培养基初始pH7.0。在此条件下,LOX酶活力为(21261.60±264.03)U/mL,比优化前的(13553.96±46.64)U/mL提高了56.87%。
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