pEGFP-C2-GATA4真核表达载体的构建及在P19细胞中的表达

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目的:构建小鼠GATA4基因融合绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP—C2-GATA4,并检验其在P19细胞中的瞬时表达.方法:以真核表达质粒pEFSA—GATA4为模板,PCR扩增得到小鼠GATA4基因片段,将目的片段亚克隆到pEG—FP—C2载体,卡那霉素筛选阳性克隆,经菌落PCR、酶切鉴定和测序鉴定.将重组质粒pEGFP—C2-GATA4以脂质体法瞬时转染P19细胞,用免疫细胞化学、共聚焦扫描显微镜、PCR、免疫印记法检测GATA4在P19细胞中的表达.结果:酶切、测序结果表明将基因片段GATA4正确
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