【摘 要】
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目的探讨蛛网膜下腔出血(SAH)后R-型电压依赖性钙通道(VDCCs)对脑动脉肌源性紧张度的作用及其分子机制。方法19只SD大鼠按随机数字表法分为SAH模型组(n=9)和假手术组(n=10)，采用立体定向仪辅助下鞍上池内注射自体动脉血法制备SAH模型。模型制备5 d后将大鼠Willis环脑动脉从皮质锐性分离以及用酶促消化法急性分离出脑动脉平滑肌细胞。采用加压肌动扫描技术观察脑动脉管径及肌源性紧张度
【机 构】
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650032 昆明，昆明医科大学第一附属医院神经外二科,650032 昆明，昆明医科大学第一附属医院神经外二科,650032 昆明，昆明医科大学第一附属医院神经外二科,650032 昆明，昆明医科大学
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目的探讨蛛网膜下腔出血(SAH)后R-型电压依赖性钙通道(VDCCs)对脑动脉肌源性紧张度的作用及其分子机制。
方法19只SD大鼠按随机数字表法分为SAH模型组(n=9)和假手术组(n=10)，采用立体定向仪辅助下鞍上池内注射自体动脉血法制备SAH模型。模型制备5 d后将大鼠Willis环脑动脉从皮质锐性分离以及用酶促消化法急性分离出脑动脉平滑肌细胞。采用加压肌动扫描技术观察脑动脉管径及肌源性紧张度以及采用膜片钳实验观察VDCCs电流：对每一观察样本均采用时间序贯法依次观察其对不同VDCCs阻滞剂的反应，即记录它们位于细胞外液(细胞外液组)、含1 μmol/L硝苯地平(L-VDCCs阻滞剂)的细胞外液(细胞外液+硝苯地平组)和同时含1 μmol/L硝苯地平及200 nmol/L SNX-482(R-VDCCs阻滞剂)的细胞外液(细胞外液+硝苯地平+SNX-482组)中的管径、肌源性紧张度及VDCCs电流密度。
结果(1)在假手术组大鼠中，细胞外液+硝苯地平组脑动脉管径显著扩大、肌源性紧张度显著下降，与细胞外液组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；但细胞外液+硝苯地平+SNX-482组脑动脉管径并未进一步扩大、肌源性紧张度并未进一步下降，与细胞外液+硝苯地平组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在SAH模型组大鼠中，细胞外液+硝苯地平组脑动脉管径显著扩大、肌源性紧张度显著下降，与细胞外液组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；而细胞外液+硝苯地平+SNX-482组脑动脉管径进一步扩大、肌源性紧张度进一步下降，与细胞外液+硝苯地平组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)假手术组脑动脉平滑肌细胞在细胞外液组中的VDCCs电流密度达最大值(-4.88±0.41)，在细胞外液+硝苯地平组中VDCCs电流被完全抑制。SAH模型组脑动脉平滑肌细胞在细胞外液组中的VDCCs电流密度达最大值(-4.97±0.41)，在细胞外液+硝苯地平组中VDCCs电流密度降至-1.96±0.37，而在细胞外液+硝苯地平+SNX-482组中VDCCs电流被完全抑制。
结论SAH后脑动脉平滑肌细胞出现R-VDCCs电流并与肌源性紧张度的维持密切相关，R-VDCCs可能是SAH后介导脑血流自身调节障碍发生的关键分子之一。
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