【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-24(miR-24)对氧化应激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和管腔形成的影响及其机制.方法 将HUVECs分为5组:空白组、H2O2组、miR-24组、anti-miR-24组和
【机 构】
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广西医科大学药学院,广西南宁,530021;广西中医药大学附属广西国际壮医医院,广西南宁,530021
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目的 探讨微小RNA-24(miR-24)对氧化应激下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和管腔形成的影响及其机制.方法 将HUVECs分为5组:空白组、H2O2组、miR-24组、anti-miR-24组和miR-NC组.空白组细胞不做任何处理,H2O2组用500 μmol·L-H2O2处理12 h,miR-24组、anti-miR-24组和miR-NC组分别转染miR-24高表达、anti-miR-24及对照慢病毒质粒后,再用500 μmol·L-1H2O2处理12 h.以二氢乙啶荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,人工基底膜检测HUVECs管腔形成能力,蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)/磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)表达水平.结果 空白组、H2 O2组、miR-NC、miR-24组和anti-miR-24组的细胞ROS含量分别为(100.00±0.00)％,(208.00±4.58)％,(203.03±5.57)％,(271.67±4.50)％和(138.03±2.65)％;这5组的管腔节点数分别为677.01±52.84,304.55±23.40,311.22±38.17,242.44±12.79和439.11±25.68;这5组的蛋白表达量(p-Akt/Akt)分别为0.72±0.03,0.41±0.01,0.41±0.03,0.27±0.06和0.56±0.02;这5组的p-eNOS/eNOS表达量分别为0.61±0.02,0.38±0.03,0.37 ±0.01,0.27±0.03和0.47±0.03.上述指标:H2O2组与空白组比,差异均有统计学意义(均P ＜0.05);miR-NC、miR-24组和anti-miR-24组与H2O2组比,miR-24组和anti-miR-24组的差异均有统计学意义(均P ＜0.05).结论 在氧化应激条件下,miR-24可增加ROS水平,降低NO生物利用度,进而抑制HUVECs增殖迁移和管腔形成,这可能与miR-24抑制Akt/eNOS蛋白的磷酸化水平有关.
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