【摘 要】
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目的 探讨大气颗粒物(PM2.5)对皮肤角质形成细胞的生物学效应.方法 角质形成细胞株(HaCaT细胞)暴露于不同浓度PM2.5混悬液(0～400μg/ml)24 h,采用CCK-8法检测不同浓度及不同暴
【机 构】
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陆军军医大学大坪医院皮肤科, 重庆,400042
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目的 探讨大气颗粒物(PM2.5)对皮肤角质形成细胞的生物学效应.方法 角质形成细胞株(HaCaT细胞)暴露于不同浓度PM2.5混悬液(0～400μg/ml)24 h,采用CCK-8法检测不同浓度及不同暴露时间(1～24 h)的细胞存活率;Annexin V法检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测不同浓度处理组细胞内细胞因子CCL20 mRNA的表达水平及CCL20分泌浓度;免疫印迹试验(Western blot)检测细胞中核转录因子(NF)-κB信号通路相关蛋白的表达水平.结果 与对照组(0μg/ml)相比,当PM2.5浓度≥50μg/ml或刺激时间≥3 h时,各组细胞存活率均显著降低(P<0.05);随着PM2.5刺激浓度增高(PM2.5浓度≥50μg/ml),各组细胞凋亡率均显著增高(P<0.01),细胞中炎性因子CCL20的mRNA表达水平显著上调(P<0.05);随着PM2.5刺激浓度增高(PM2.5浓度≥25μg/ml),CCL20分泌水平显著上调(P<0.05);Western blot检测显示细胞中NF-κB信号通路关键蛋白p65的磷酸化水平表达上调.结论 PM2.5可降低角质形成细胞存活率,促进细胞凋亡,且可能通过激活NF-κB信号通路诱导角质形成细胞内细胞因子CCL20的表达上调,进而介导多种慢性皮肤炎症反应.
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