牛羊肉中掺杂猪肉的PCR方法的建立和初步应用

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根据GenBank中的猪源性的特异性基因序列设计一对特异性引物,对所提取的猪肉基因组DNA进行特异性的扩增,用于生熟猪肉及制品的鉴定。扩增出的PCR产物为特异的212 bp核苷酸片段,用限制性内切酶MnlⅠ进行酶切鉴定,酶切产物分别为196 bp和16 bp。PCR产物和酶切产物的片段大小与预期的目标相符合。特异性试验结果表明,从生熟猪肉中能扩增出特异性的核苷酸片段,但牛、羊、马、驴、兔和鸭等12种动物DNA的扩增结果均为阴性。敏感性试验结果表明,该方法的敏感性可达16.34 pg DNA。利用建立的PCR方法共对105份保定市售牛、羊和猪肉进行鉴定,结果显示,PCR方法检测肉制品中猪源性成分快速和简便,且具有较高的特异性和敏感性,可作为牛羊肉中猪源性成分快速检测的手段。
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