重组毕赤酵母产匍枝根霉内切葡聚糖酶Ⅱ的分离纯化及其酶学性质研究

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将来源于匍枝根霉的endoglucanaseⅡ(egⅡ)在毕赤酵母中实现异源表达,对构建完成的重组毕赤酵母进行高密度发酵,制备目标酶蛋白.发酵液经Ni柱分离纯化,得到分子量大小约为38kDa,比酶活为37.8IU/mg的蛋白.酶学性质研究表明:该酶最适反应温度为55℃,最适反应pH为4.8;Mn2+、Zn2+、Fe2+对egⅡ的酶活力有一定的激活作用,Cu2+对egⅡ酶活有抑制作用,Mg2+、Co2+、Na+和K+等离子对该酶的催化活力没有明显影响;该酶以CMC-Na为底物时其反应米氏常数为2.04mg/
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