【摘 要】
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为了一次性检测临床样品中是否存在鸭新城疫病毒（NDV）、鸭瘟病毒（DPV）或鸭坦布苏病毒（DTMUV）感染,本研究根据GenBank已登录的3种病原的保守基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过
【机 构】
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江西省农业科学院畜牧兽医研究所,福建省农业科学院畜牧兽医研究所
【基金项目】
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江西省重点研发计划项目(20161BBF60141);江西省青年科学基金项目(20171BAB214016);江西省水禽产业技术体系建设专项(JXARS-09);国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-42);福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项(2017R1023-16)
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为了一次性检测临床样品中是否存在鸭新城疫病毒（NDV）、鸭瘟病毒（DPV）或鸭坦布苏病毒（DTMUV）感染,本研究根据GenBank已登录的3种病原的保守基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了可同时检测NDV、DPV和DTMUV的多重PCR检测方法。特异性检验表明,该多重PCR方法可同时扩增出NDV（510bp）、DPV（400bp）、DTMUV（300bp）的特异片段,对其他鸭常感染病毒扩增结果均为阴性;敏感性测定表明,该多重PCR技术最低能检出1.02×104拷贝·μL-1 NDV、3.50×103拷贝·μL-1 DPV和1.17×104拷贝·μL-1 DTMUV。采用建立的多重PCR方法对250份临床样品进行检测结果显示,其检测结果与该3种病毒的常规单一PCR检测结果符合率为100%。以上结果表明,本研究建立的多重PCR检测方法具有快速、特异性强、敏感性高等优点,适用于临床样品中上述3种病原的检测。
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