AFP基因SiRNA表达质粒的构建及鉴定

来源 :山东大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kui5387

【摘要】

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目的:构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因siRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法:选择RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSilencer3.0-H1连

【作者】

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亓同钢汪运山王芳吴文秀关广聚

【机构】

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山东大学第二医院临床分子生物学实验室,山东大学临床医学院济南市中心医院中心实验室

【出处】

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山东大学学报：医学版

【发表日期】

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2004年3期

【关键词】

：

质粒甲胎蛋白类基因表达 Plasmids Alpha-fetoproteins Gene expression

【基金项目】

：

山东省自然科学基金

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目的:构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因siRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法:选择RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSilencer3.0-H1连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.结果:纯化的质粒的分子量为2.8 Kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论:成功构建了针对AFP基因的siRNAs表达质粒.

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