产志贺毒素大肠杆菌stx2基因荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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目的建立检测产志贺毒素性大肠杆菌(STEC)stx2基因荧光定量PCR方法。[方法]根据GenBank中已发表的STECstx2基因序列.在保守区域设计PCR引物和探针.构建重组质粒作为阳性模板,优化反应条件,建立荧光定量PCR方法。[结果]利用优化的荧光定量PCR反应体系建立了标准曲线。表明起始模板浓度与ct值之间线性关系好,相关系数R2均达0.995以上:此方法特异性好.对10种非StEC肠道病菌无特异性扩增:敏感性高。初始模板的检出下限达1.0x10^2拷贝数/μl;重复性好.批内、指间变异系数均分
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