本研究拟建立饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和伏马毒素B1(FB1)的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)同步检测方法.在配合饲料和玉米样品前处理方法比较和液质条件探索试验的基础上,通过标准曲线绘制、回收率、精密度和重复性试验,评价HPLC-MS检测4种霉菌毒素的效果.结果显示:HPLC-MS检测毒素样品的最佳提取试剂为84％乙腈水(V/V),最佳条件为C8柱,流动相为1％甲酸醋酸铵溶液,扫描方式为正负离子扫描模式,检测方式为多反应监测.AFB1、FB1、ZEN、DON浓度分别在0.01～1000、10～2000、0.1～2000、10～100000μg/kg时,峰面积和毒素浓度呈现出良好的线性关系,相关系数R2值均在0.99以上.加标回收率和重复性试验RSD值分别在0.22％～3.24％和0.15％～3.61％,方法精确度和精密度良好.以上结果说明,本研究建立的同步检测饲料中AFB1、DON、FB1和ZEN的HPLC-MS法线性关系良好,回收率高,精密度好,方法确实可行.