小鼠OX40真核表达载体的构建及表达

来源 :潍坊医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：striveadvance

【摘要】

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目的构建小鼠OX40的真核表达载体。方法从ConA活化的小鼠牌淋巴细胞中提取总RNA，应用RT-PCR方法，扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA，并将其克隆到PUCm-T载体，经PCR、酶切和测序分析

【作者】

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原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳苗乃法

【机构】

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潍坊医学院免疫学教研室

【出处】

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潍坊医学院学报

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

：

OX40 绿荧光蛋白表达载体稳定表达 OX40 pIRES2-EGFP vector Stable expression

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目的构建小鼠OX40的真核表达载体。方法从ConA活化的小鼠牌淋巴细胞中提取总RNA，应用RT-PCR方法，扩增获得编码小鼠OX40分子的cDNA，并将其克隆到PUCm-T载体，经PCR、酶切和测序分析证实，进而脂质体法转染HUVECS，G418筛选，RT-PCR法鉴定获得表达OX40分子的阳性细胞株。结果构建的pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体经PCR、酶切和测序分析，证实该片段与GeneBank记载的小鼠OX40cDNA序列完全一致。筛选获得能表达小鼠OX40蛋白的HUVECs转基因细胞

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