【摘 要】
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目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)-蛋白激酶B(Akt)-糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)通路对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺血再灌注(IR)损伤过程中细胞凋亡的调控及重组人红细胞生成素(
【机 构】
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武汉市第一医院肾内科,华中科技大学同济医学院附属协和医院肾内科,华中科技大学同济医学院附属梨园医院肾内科
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目的 探讨磷脂酰肌醇-3激酶(P13K)-蛋白激酶B(Akt)-糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)通路对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺血再灌注(IR)损伤过程中细胞凋亡的调控及重组人红细胞生成素(rHuEPO)的保护作用.方法 正常培养的HK-2细胞,分为7组:正常对照组、IR组、LY294002干预组(P13K-Akt阻断剂,10 μmol/L)、LiCl干预组(GSK-3β阻断剂,20μmol/L)、rHuEPO干预组(20 U/L)、rHuEPO+LY294002干预组、rHuEPO+LiCl干预组.Westem印迹法榆测Akt(Ser473)、GSK-3β(Set9)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)活性;MTT法检测细胞活力;Annexin V和PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡.结果 IR损伤诱导HK-2细胞凋亡率上调(15.20%±1.43%)、Akt活性水平下降、GSK-3β及caspase-3酶活性水平上调,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P
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