【摘 要】
：
目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的sRNA伴侣蛋白Hfq.方法:利用PCR方法从EHEC O157:H7基因组中扩增出基因hfq,并插入含6xHis标签序列的原核表达载体pET28
【机 构】
：
西北农林科技大学,军事医学科学院,内蒙古农业大学
论文部分内容阅读
目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的sRNA伴侣蛋白Hfq.方法:利用PCR方法从EHEC O157:H7基因组中扩增出基因hfq,并插入含6xHis标签序列的原核表达载体pET28a(+)的多克隆位点中,构建重组表达质粒pET28a(+)-hfq,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导目的基因表达,采用Western印迹法进行鉴定,通过Ni2+螯合柱纯化获得目的蛋白.结果:质粒酶切鉴定结果表明pET28a(+)-hfq重组质粒构建成功;对目的蛋白进行了融合表达,SDS-PAGE显示相对分子质量约17x103的蛋白特异表达条带;对表达产物进行亲和纯化,从上清中获得了Hfq的融合蛋白.结论:得到了sRNA伴侣蛋白Hfq,为进一步筛选与该蛋白有相互作用的sRNA,研究sRNA的功能奠定了基础.
其他文献
布鲁杆菌病(简称布病)是由布鲁杆菌引起的一种人畜共患的传染变态反应性疾病.传染源主要是患病的羊、牛、猪等家畜.青海省达日县布病疫情经过多年防治趋于稳定,为了全面掌握
农产品贸易对中日双方的国内经济发展有着重大意义,但是中日农产品贸易摩擦不断,严重影响了两国的正常贸易,已经引起了学术界和政府决策者的高度关注.文章从中日农产品贸易的
Objective This study analyzed patterns of suicide and suicide attempts by poisoning as reported through a national poison control system for the purpose of impr
为选育抗旱性强、耗水少、水分利用效率高的品种.以22个玉米自交系为材料,采取正常灌溉和适度水分胁迫处理,对自交系叶片水分利用效率(WUE)、光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气
[目的]蜜蜂是一种重要的传粉昆虫,近年来世界各地出现了严重的种群衰退现象,原因之一是农业生产过程中使用了大量农药。采用摄入法测定了300个农药制剂对蜜蜂的急性经口毒性,
为建立锦鲤疱疹病毒(KHV)多靶基因PCR检测方法,本实验将KHV接种鲤鱼鳍条细胞,收获病变细胞悬液,提取DNA,根据GenBank中登录的KHV基因序列及出入境检验检疫行业标准推荐的基因
目的 探讨雌激素受体α(ERα)基因敲除小鼠的优化繁育方法及ERα基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,建立ERα基因敲除小鼠模型,为进一步研究ERα蛋白的功能奠定基础.方法 用4种不
防御素是在植物以及动物界广泛存在的一类阳离子多肽,是抗菌肽(一类具有广谱抗菌作用的短链多肽)中具有代表性的亚家族,是十分保守的宿主防御分子.至今为止,已发现多种防御素
目的 采用L9(33)正交实验法,研究淫羊藿叶片中类胡萝卜素的最优提取工艺.方法 以β-胡萝卜素得率为指标,以乙醇浓度、提取温度、提取时间为因素进行正交实验.结果 影响淫羊藿
目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化及体外培养条件.方法 采用组合酶消化法分离纯化小鼠精原细胞和支持细胞,在添加FSHC和TC的基本培养基中进行体外培养.采用反转录PCR方法检测