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用胶原酶消化、差异离心和尼龙网过滤的方法分离鼠脑微血管内皮细胞，建立其体外长期培养方法。经形态学、免疫组化，酶学鉴定，培养细胞为脑微血管内皮细胞，动态观察培养细胞酶含量变化，发现随着细胞培养时间的延长，血管紧张素转换酶Ⅰ（ACE）呈上升趋势，而γ－谷氨酰胺转化酶（γ-GT）和硷性磷酸酶（ALP）则明显下降，实验结果提示，血脑屏障的主要功能酶γ－GT和ALP可作为体外脑微血管内皮细胞的标志酶，但要维持长时间体外表达则需要某种因子的介导。本实验可为体外研究血脑屏障及相关疾病提供帮助。