【摘 要】
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SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白。为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(31072113);兽医生物技术国家重点实验室基金项目(SKLVBP2012)
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SAMHD1是最近发现的在人髓系细胞中发挥抗艾滋病毒作用的一种天然蛋白。为制备抗人huSAMHD1蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究利用原核表达并纯化的人huSAMHD1重组蛋白为免疫原,经腹腔免疫4周龄BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA法筛选和4次有限稀释法克隆纯化,获得了1株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株。Western blot与间接免疫荧光试验结果表明,获得的MAb与人huSAMHD1的真核表达蛋白呈阳性反应,而与猴、马SAMHD1的真核表达蛋白呈阴性反应,表明其具有很好的特异性,可以用于ELISA、免疫荧光和免疫印迹检测以及对huSAMHD1的进一步研究。
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