目的探讨一氧化氮供体对哮喘儿童来源的中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的诱导作用,寻找新的可能用于儿童哮喘的监测指标和治疗靶点。方法选取2017年9月-2017年11月就诊于上海市第五人民医院儿科的38例支气管哮喘患儿为研究对象,利用Percoll密度梯度离心法从哮喘儿童的外周血中分离出中性粒细胞,加入一氧化氮供体SNP进行体外孵育,荧光染色法检测细胞上清中的双链DNA(NETs的主要组分)做定量分析,同时制备细胞爬片并利用免疫荧光的方法观察NETs的主要结构,此外还利用一氧化氮合酶(NOS)的抑制剂对SNP的诱导进行干预实验。结果成功从哮喘儿童外周静脉血中分离出中性粒细胞,回收率达95%以上,细胞活性大于80%;PMA、SNP组在诱导3h后明显可见释放到胞外的丝网状NETs结构,而PBS、SNP+L-NAME、SNP+SMT组在诱导3h后均未见明显的NETs结构;干预组(PMA 160nmol/L、LPS 100ng/ml、SNP 400μmol/L)的NETs相对生成量均大于阴性对照PBS组(P<0.05);SNP+NOS阻滞剂组(SMT 10mmol/L、L-NAME 500μmol/L、L-NMMA 1 mmol/L)的NETs相对生成量均小于单纯SNP组(P<0.05);NOS抑制剂能够减少但不能完全阻滞NETs的生成(P<0.05);SNP诱导的第1h、2h、3h的NETs相对生成量呈持续上升趋势,而PBS组在第3h生成量下降(P<0.05);随着L-NAME干预时间的延长,SNP诱导的NETs相对生成量持续减少(P<0.05)。结论 SNP能够诱导哮喘儿童NETs形成,同时NOS的抑制剂能够减少NETs的产生,为儿童哮喘的监测和治疗提供了新的思路。