人β-微管蛋白2C蛋白的原核表达与纯化

来源 :新乡医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhangdeyu520

【摘要】

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目的构建体外原核表达和纯化人β-微管蛋白2C（TubB2C）蛋白。方法通过聚合酶链反应（PCR）扩增出人TubB2C基因完整开放读码框架（ORF）,并插入pGEX-6P-1载体中构建pGEX-TubB2C重组质粒。

【作者】

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武慧娟田田王露徐宁王丛阳何泽沈传陆

【机构】

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东南大学医学院病理生理学教研室

【出处】

：

新乡医学院学报

【发表日期】

：

2009年3期

【关键词】

：

人β-微管蛋白2C基因原核表达蛋白纯化 human beta-tubulin 2C gene prokaryotic expression protei

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（编号：30670808）

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目的构建体外原核表达和纯化人β-微管蛋白2C（TubB2C）蛋白。方法通过聚合酶链反应（PCR）扩增出人TubB2C基因完整开放读码框架（ORF）,并插入pGEX-6P-1载体中构建pGEX-TubB2C重组质粒。经大肠杆菌BL21转化后,用异丙醇-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导谷胱甘肽S转移酶（GST）-TubB2C融合蛋白表达,用免疫印迹（W estern b lot）分析鉴定表达的GST-TubB2C蛋白,并在非变性条件下利用G lutath ione Sepharose 4B纯化GST-Tu

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