目的建立HLB固相萃取小柱与超高效液相色谱(UPLC)串联质谱法快速筛查23种磺胺类和3种氯霉素类药物残留的方法。方法乙腈将23种磺胺类和3种氯霉素类药物共同提取、正己烷除脂后经HLB小柱净化,超高效液相色谱分离,串联四极杆质谱多反应监测(MRM)模式检测。结果弱酸(pH5.5)环境下HLB小柱上保留最好;Waters Acquity UPLCTMBEH C18分离柱(1.7μm,2.1 mm×100 mm),流速0.4 mL/min,柱温40℃条件下,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相梯度洗脱分离效果和灵敏度最佳,洗脱时间共为7.2 min;磺胺类和氯霉素类药物分别以正离子和负离子模式检测,分多时间段采集数据。在1.0～20.0μg/L的线性范围内23种磺胺类和3种氯霉素类药物线性良好,线性相关系数r均大于0.99,方法检出限为0.1μg/kg,定量下限为0.1～1.0μg/kg,23种磺胺类和3种氯霉素类药物回收率分别为61.0%～109.6%、82.5%～106.0%,相对偏差0.56%～10.8%、1.3%～4.9%。结论该方法操作简单、灵敏,适合快速筛查和监测鱼肉中的多组份磺胺和氯霉素类药物残留。