弓形虫SAG1的高密度发酵表达、纯化及免疫反应性鉴定

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:crazy915
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目的探讨弓形虫SAG1在大肠杆菌中的高密度发酵表达及其批量制备流程。方法利用高密度发酵大肠杆菌批量表达rSAG1,经Ni—NTA、SephadexG.75及切胶等纯化工艺对重组蛋白进行纯化,用westem blotting鉴定其免疫反应性,ELISA验证rSAG1检测弓形虫抗体的敏感性与特异性。结果高密度发酵诱导4h后工程菌液的0D。达到20-21;平均每升发酵液可收获工程菌26.19g;目标蛋白的表达量占菌体蛋白的25.82%;经Ni—NTA、Ni—NTA联合Sephadex G-75及Ni—NTA联合
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