【摘 要】
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目的开展基因重组AT-Ⅲ的研究,试将人AT-ⅢcDNA在CHO细胞中进行表达.方法将携带AT-Ⅲ基因的表达载体转染CHO细胞,用G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE与Western Blot检测其表达产物;
【机 构】
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北京输血研究所,北京医学情报研究所
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目的开展基因重组AT-Ⅲ的研究,试将人AT-ⅢcDNA在CHO细胞中进行表达.方法将携带AT-Ⅲ基因的表达载体转染CHO细胞,用G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE与Western Blot检测其表达产物;并采用生化法测定AT-Ⅲ的表达量,采用凝血酶空斑法测定表达产物的活性.结果 Western Blot分析发现转移至膜上的表达产物能与抗AT-Ⅲ单克隆抗体结合,分子量与人血浆中AT-Ⅲ一致,证明在CHO细胞中成功地表达了AT-Ⅲ,并具有天然AT-Ⅲ的生物活性.结论获得了表达AT-Ⅲ CHO细胞株.
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