【摘 要】
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目的 研究长春西汀对帕金森病细胞模型的保护作用和机制.方法 以100 μmol·L-16-羟基多巴胺损伤SH-SY5Y细胞构建帕金森病模型,分为模型组和给药组,给药组在模型组的基础上分
【机 构】
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中山大学附属第三医院药学部,广州510630;广东食品药品职业学院实验实训中心,广州510520
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目的 研究长春西汀对帕金森病细胞模型的保护作用和机制.方法 以100 μmol·L-16-羟基多巴胺损伤SH-SY5Y细胞构建帕金森病模型,分为模型组和给药组,给药组在模型组的基础上分别加入不同浓度的长春西汀孵育24 h,另设空白组仅加入维生素C平行操作.以CCK-8法检测细胞存活率摸索长春西汀的有效浓度,流式细胞法检测细胞的凋亡率,Hoechst33258染色观察细胞的凋亡状况,比色法检测过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量,ELISA 法检测白细胞介素 1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子的含量.Western blotting 检测 N-甲基-D-天冬氨酸受体 1(N-methyl-D-aspartate receptor 1,NMDAR1),α-突触核蛋白,cleaved caspase-9的表达量.结果 与模型组相比,给药组细胞随着长春西汀浓度的增加,存活率逐渐上升而凋亡率随之下降且可观察到的凋亡小体数量逐渐减少,细胞中CAT、SOD含量随药物浓度增加而递增,MDA生成量则相应降低,IL-1β、IL-6、TNF-α的含量随药物浓度增加而递减(P＜0.05或P＜0.01).Western blotting结果表明,与模型组相比,给药组细胞的NMDAR1、cleaved caspase-9的含量均降低而α-突触核蛋白的表达量显著增加(P＜0.05或P＜0.01).结论 长春西汀可通过下调NMDAR1和上调α-突触核蛋白的表达,抑制caspase-9的激活,降低氧化应激和炎症因子的生成,对帕金森病模型的神经细胞产生保护作用.
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