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目的：通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒（HIV）Nef抗原，制备特异抗血清，为Nef抗原检测提供技术方法。方法：以HIVBotswana毒株基因组为模板，用PCR法获得Nef蛋白编码基因，将其克隆到pET30a载体中，在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白；用纯化的融合蛋白免疫BALB／c小鼠获得抗血清，用真核表达的Nef抗原对其特异性进行分析。结果：构建的Nef融合基因在大肠杆菌中获得表达，相对分子质量约为36x103，免疫BALB／c小鼠获得针对融合蛋白的高效价抗血清，ELISA抗体滴度为1：6400；免疫荧光