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本研究选择O型FMDV VP1基因上保守序列作为可能的干扰位点,合成了siRNA,将siRNA克隆到pSIREN—Shuttle中,获得siRNA重组表达载体pShuttle-VP1。用限制性内切酶PI—SceI和I-CeuI双酶切siRNA重组表达载体和腺病毒质粒载体pAdeno-X,利用体外连接法获得了重组质粒。经过PCR扩增、酶切鉴定及序列测定,证明成功构建了重组腺病毒质粒pAdeno—VP1。利用脂质体转染法,将PacI线性化的重组腺病毒质粒pAdeno-VP1转染HEK293细胞,包装成重组腺病