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目的 研究缺氧诱导因子1α(HIF1α)在3种弓形虫虫株由速殖子到缓殖子转化过程中的作用,阐释HIF1α对弓形虫不同毒力虫株转化的影响. 方法 选取3种不同毒力弓形虫虫株(Ⅰ型RH-C-FP,Ⅱ型ME49-GFP和Ⅲ型VEG),分别感染野生型HIF1α细胞(HIF1α WT)和缺陷型HIF1α细胞(HIF1α KO),在碱性条件下进行诱导转化,通过免疫荧光试验(Immunofluorescence assay,IFA)检测不同条件下弓形虫诱导转化情况,通过细胞中 RH-GFP和ME49GFP荧光值的变化分析Ⅰ型和Ⅱ型弓形虫的转化水平.无荧光标记的Ⅲ型VEG虫株选用速殖子特异性表达蛋白SAG1作为弓形虫速殖子阶段的特异性标记.将包裹弓形虫缓殖子囊肿外层的囊壁作为缓殖子的特异性识别标记,用DBA抗体识别,将封片的载玻片置于荧光显微镜下观察并计数.将玻片上总量为300个被弓形虫感染的细胞分为3组:(1)只含有速殖子(GFP);(2)只含有缓殖子(DBA);(3)同时含有速殖子和缓殖子(GFP+DBA).每个实验条件至少分别计数3张玻片并计算其平均值. 结果 最佳诱导转化时间为诱导后96 h,Ⅰ型RH-GFP弓形虫感染的HIF1α KO细胞中均不包含DBA和GFP+ DBA的细胞,而只含有速殖子GFP蛋白标记,RH-GFP感染的HIF1αWT细胞中偶见极少数速殖子到缓殖子的中间转化标识GFP+ DBA;Ⅱ型ME49-GFP弓形虫感染的HIF1α KO细胞中无诱导转化,而在HIF1α WT细胞中有20％～25％只含有DBA的细胞,30％左右只含有GFP的细胞,其他大部分细胞均处于转化中期.Ⅲ型VEG弓形虫感染的HIF1α KO细胞中无诱导转化,而大部分HIF1αWT细胞中的VEG发生了速殖子到缓殖子的转化,完全转化为DBA的比例为55％～60％. 结论 HIF1α是弓形虫虫株从速殖子转化为缓殖子的必要条件,且虫株转化速率与虫株毒力成反向调控.