【摘 要】
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为了建立广西巴马小型猪附睾成纤维细胞体外培养体系,利用微量液体组织块贴壁法原代培养分离附睾成纤维细胞,进行常规传代培养、冷冻和复苏,并通过接触抑制和解除抑制研究细
【机 构】
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广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西大学动物科技学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30860039）,农业部“转基因生物新品种培育重大专项”项目（2009ZX08010-023B）,广西科学研究与技术开发计划项目（桂科能0815011-6-3）,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室开放课题基金项目（SB0807）
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为了建立广西巴马小型猪附睾成纤维细胞体外培养体系,利用微量液体组织块贴壁法原代培养分离附睾成纤维细胞,进行常规传代培养、冷冻和复苏,并通过接触抑制和解除抑制研究细胞的增殖能力,以及通过免疫荧光对其进行鉴定。结果表明,该法成功分离获得广西巴马小型猪附睾成纤维细胞,并可以大量传代和冷冻,目前已经传至55代以上,生长良好;冷冻复苏和接触抑制解除后仍可以正常培养和传代;细胞免疫荧光检测,波形蛋白表达阳性。可见,通过微量液体组织块贴壁法能成功分离得到广西巴马小型猪附睾成纤维细胞,在体外能稳定培养和传代。
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