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摘要：本文通过抽取仓中的小麦人工制备13.5%、14.0%、15.0%三个水分梯度的高水分小麦，将人工制备的高水分粮装入整理箱（每个不小于100公斤），放入本库301仓内储存。储存过程中检测灰绿曲霉的变化进行高水分粮真菌危害预报。得出如下结论：13.5%的小麦11月份入仓在本地区可以安全度夏；14.0%的小麦在本地区11月份入仓，气温为35.1℃，气湿为70.4%，仓温为24.5℃，仓湿为73.4%，粮温为21.4℃，可安全储存270天左右；15.0%小麦低温情况下储存10天即长菌，不适合在本地区储存。
关键词：检测 高水分粮 灰绿曲霉 真菌 预报
中图分类号：S379 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）04-0040-02
在粮食储藏过程中，可对粮食构成危害的真菌，主要是曲霉和青霉。最初生长的真菌是灰绿曲霉和局限曲霉，一般不会对粮食质量产生影响，但可作为储粮真菌危害检测的警示菌。第二阶段是亮白曲霉和黄曲霉，这些真菌的生长可引起粮食发热、霉变、结块，是储粮中需要重点控制的微生物。
低水分区，危害真菌以灰绿曲霉生长为主，高水分区，以亮白曲霉生长为主，水分16%为两种真菌生长的拐点，灰绿曲霉生长逐渐由强到弱，亮白曲霉逐渐由弱到强。这一研究结果进一步证实，危害真菌的生长，随着粮食水分的增加，具有明显的演替规律，通过检测粮堆中灰绿曲霉的变化，可进行储粮真菌危害的预报。在储粮过程中危害真菌的生长，会产生大量的CO2，采用传感技术，用便携式生物危害检测仪可准确检测出CO2的含量，它们含量多少与真菌生长（危害）程度有良好的相关性，通过检测粮食中这些物质的变化，可进行储粮真菌危害的早期检测，查找疑似真菌生长点。对疑似真菌生长点进行取样检测真菌孢子，通过检测粮堆中储藏真菌孢子数的变化，可对储粮真菌生长（危害）情况进行判定。
1 实验目的
通过模拟实仓实验用真菌孢子计数法来探索高水分粮储存时间，获取高水分粮储存时间的极限数据，为制定高水分粮短期储存相关指标和管理办法提供依据。
2 实验材料
2.1 实验仓房情况
实验仓为本库301仓，仓型为高大平房仓，仓房尺寸为36m×23m×5.5m。
2.2 实验仓储粮情况
301仓储存小麦，储粮基本情况见下表1。
2.3 仪器及材料
便携式生物危害检测仪；
插入式温度计；
滤布：网孔300目，裁剪成10cm×10cm小块；
血球计数板：16中方格规格或25中方格规格，V等于0.1mm3；
计数器：计数范围为0-9999，转动式回零；
电子天平：感量0.1g；
生物显微镜：放大倍数600-800×；
所用水无特别说明为符合国家实验室一级水标准。
3 实验方法
3.1 试验样品的准备工作
高水分小麦初始信息如表2。
由于难以找到高水分小麦试验仓进行局部模拟高水分粮试验，选择未检出真菌孢子的小麦用于人工制备高水分粮，人工制备三个水分梯度的高水分小麦：13.5%、14.0%、15.0%，首先用105℃烘干法测定其水分为12.0%，计算出调节到目标水分所需要加的蒸馏水的质量，粮食调节水分后平衡两天，混匀后取样检测含水量（105℃），检测结果与理论值接近，误差在±0.2%范围内。将人工制备的高水分粮装入整理箱（每个不小于100公斤），整理箱规格为70cm×50cm×70cm，每个水分梯度监测点为5个，放入正常储存粮仓中。箱体埋入粮食中，打开箱盖，使上口与粮面齐平。玉米应选择收获季节的天然高水分玉米：15%，15.5%，16.0%，每个水分梯度5个监测点，放入本库301仓内储存。
3.2 数据采集
在储粮过程中，真菌的生长、呼吸作用会产生大量的CO2，采用传感技术，用携式生物危害检测仪可准确检测出CO2的含量，它们含量多少与真菌生长（危害）程度有良好的相关性，通过检测粮食中这些物质的变化，可进行储粮真菌危害的早期检测，查找疑似真菌生长点。每隔10天对各监测点进行一次跟踪检测筛查，便携式生物危害检测仪可以给出Ⅰ级—安全；Ⅱ级—临界；Ⅲ级—危害；Ⅳ级—严重危害4级储粮状况判定。检测时，应将仪器气体采集管插入粮堆0.35-0.5m，同时采用插入式温度计检测同一位点温度。每次需详细记录每个点的储粮状况，包括CO2浓度、温度、湿度等。
3.3 取样检验
对疑似真菌生长点，用手动取样器取样约200g，立即用塑料袋密封，当天测定水分（105℃）和真菌孢子数。剩余样品放4℃冷藏保存，至下一次样品检验结果出来。
3.3.1 真菌孢子数测定方法如下
称取10.0g样品于试管中，用移液管准确加入30.0ml水，以120-150/min的频率用力振摇1min，立刻用300目滤布过滤，用胶头滴管插入试管底部吹吸3次，清洗滴管，取第四次吸液立即点样，点样后的计数板静置10s以上，置于显微镜置物台，显微观察孢子不移动即可开始计数。
计数原则：计上不计下，计左不计右。
3.3.2 计算方法
（1）每毫升清洗液中真菌孢子数计算公式：
x1=A×5×104=50000×A
x1——25个中方格规格计数板内的真菌孢子总数，单位为个每毫升（个/mL）；
A——计数室中5个中方格内真菌孢子总数，单位为个（个）。
（2）样品中真菌孢子数计算公式：
x2=x1×（30/10）
x1——25个中方格规格计数板内的真菌孢子总数，单位为个每毫升（个/mL）； x2——每克粮食样品中真菌孢子总数，单位为个每克（个/g）；
根据大量实验室和实仓研究，该方法对储粮真菌危害检测的结果，提出了一个初步的判定标准，共分四级。
3.4 监测结束时间
对连续两次均检测有真菌生长的点，即可确认此点为微生物生长点，记录真菌初期生长时间和粮食水分，监测即可结束。同时记录该点的CO2、温度、湿度等相关信息。
4 结果与分析
4.1 仓温与粮温变化情况（图1）
试验期间仓温与高水分粮粮温跟踪情况见图1。粮温与仓温均呈下降后上升趋势，粮温最高达28℃，最低为1.0℃；仓温最高为27.6℃，最低为-3.6℃。
4.2 实验起始与结束时间
高水分小麦模拟实仓实验从2012年11月1号开始，至2013年8月中旬结束。高水分玉米模拟实仓实验从2012年12月20号开始，至2013年8月中旬结束。
4.3 实验期间高水分粮真菌初生长时间（见表3）
4.4 经验总结
13.5%的小麦11月份入仓在本地区可以安全度夏；14.0%的小麦在本地区11月份入仓，气温为35.1℃，气湿为70.4%，仓温为24.5℃，仓湿为73.4%，粮温为21.4℃，检测到真菌生长，可安全储存270天左右；15.0%小麦低温情况下储存10天即长菌，不适合在本地区储存。
15.0%和15.5%高水分玉米在本地区自2012年12月20号入仓，气温为35.1℃，气湿为70.4%，仓温为24.5℃，仓湿为73.4%，粮温为21.4℃，检测到真菌生长，可安全储存230天左右。16.0%高水分玉米在本地区自2012年12月20号入仓，气温为26.1℃，气湿为75.1%，仓温为22.3℃，仓湿为73.4%，粮温为18.9℃，检测到真菌生长，可安全储存200天左右。
参考文献
[1]崔基方.粮食储藏技术[M].上海科学普及出版社，2001：72-84.
[2]程树峰，唐芳，武松陵.储粮真菌危害早期检测方法的研究[J].中国粮油学报，2011，26（4）.
[3]路茜玉.粮油储藏学.中国轻工业出版社.
[4]季青跃，于兆锋，李建智等.高水分玉米储藏试验[J].粮油食品科技，2006.
关键词：检测 高水分粮 灰绿曲霉 真菌 预报
中图分类号：S379 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）04-0040-02
在粮食储藏过程中，可对粮食构成危害的真菌，主要是曲霉和青霉。最初生长的真菌是灰绿曲霉和局限曲霉，一般不会对粮食质量产生影响，但可作为储粮真菌危害检测的警示菌。第二阶段是亮白曲霉和黄曲霉，这些真菌的生长可引起粮食发热、霉变、结块，是储粮中需要重点控制的微生物。
低水分区，危害真菌以灰绿曲霉生长为主，高水分区，以亮白曲霉生长为主，水分16%为两种真菌生长的拐点，灰绿曲霉生长逐渐由强到弱，亮白曲霉逐渐由弱到强。这一研究结果进一步证实，危害真菌的生长，随着粮食水分的增加，具有明显的演替规律，通过检测粮堆中灰绿曲霉的变化，可进行储粮真菌危害的预报。在储粮过程中危害真菌的生长，会产生大量的CO2，采用传感技术，用便携式生物危害检测仪可准确检测出CO2的含量，它们含量多少与真菌生长（危害）程度有良好的相关性，通过检测粮食中这些物质的变化，可进行储粮真菌危害的早期检测，查找疑似真菌生长点。对疑似真菌生长点进行取样检测真菌孢子，通过检测粮堆中储藏真菌孢子数的变化，可对储粮真菌生长（危害）情况进行判定。
1 实验目的
通过模拟实仓实验用真菌孢子计数法来探索高水分粮储存时间，获取高水分粮储存时间的极限数据，为制定高水分粮短期储存相关指标和管理办法提供依据。
2 实验材料
2.1 实验仓房情况
实验仓为本库301仓，仓型为高大平房仓，仓房尺寸为36m×23m×5.5m。
2.2 实验仓储粮情况
301仓储存小麦，储粮基本情况见下表1。
2.3 仪器及材料
便携式生物危害检测仪；
插入式温度计；
滤布：网孔300目，裁剪成10cm×10cm小块；
血球计数板：16中方格规格或25中方格规格，V等于0.1mm3；
计数器：计数范围为0-9999，转动式回零；
电子天平：感量0.1g；
生物显微镜：放大倍数600-800×；
所用水无特别说明为符合国家实验室一级水标准。
3 实验方法
3.1 试验样品的准备工作
高水分小麦初始信息如表2。
由于难以找到高水分小麦试验仓进行局部模拟高水分粮试验，选择未检出真菌孢子的小麦用于人工制备高水分粮，人工制备三个水分梯度的高水分小麦：13.5%、14.0%、15.0%，首先用105℃烘干法测定其水分为12.0%，计算出调节到目标水分所需要加的蒸馏水的质量，粮食调节水分后平衡两天，混匀后取样检测含水量（105℃），检测结果与理论值接近，误差在±0.2%范围内。将人工制备的高水分粮装入整理箱（每个不小于100公斤），整理箱规格为70cm×50cm×70cm，每个水分梯度监测点为5个，放入正常储存粮仓中。箱体埋入粮食中，打开箱盖，使上口与粮面齐平。玉米应选择收获季节的天然高水分玉米：15%，15.5%，16.0%，每个水分梯度5个监测点，放入本库301仓内储存。
3.2 数据采集
在储粮过程中，真菌的生长、呼吸作用会产生大量的CO2，采用传感技术，用携式生物危害检测仪可准确检测出CO2的含量，它们含量多少与真菌生长（危害）程度有良好的相关性，通过检测粮食中这些物质的变化，可进行储粮真菌危害的早期检测，查找疑似真菌生长点。每隔10天对各监测点进行一次跟踪检测筛查，便携式生物危害检测仪可以给出Ⅰ级—安全；Ⅱ级—临界；Ⅲ级—危害；Ⅳ级—严重危害4级储粮状况判定。检测时，应将仪器气体采集管插入粮堆0.35-0.5m，同时采用插入式温度计检测同一位点温度。每次需详细记录每个点的储粮状况，包括CO2浓度、温度、湿度等。
3.3 取样检验
对疑似真菌生长点，用手动取样器取样约200g，立即用塑料袋密封，当天测定水分（105℃）和真菌孢子数。剩余样品放4℃冷藏保存，至下一次样品检验结果出来。
3.3.1 真菌孢子数测定方法如下
称取10.0g样品于试管中，用移液管准确加入30.0ml水，以120-150/min的频率用力振摇1min，立刻用300目滤布过滤，用胶头滴管插入试管底部吹吸3次，清洗滴管，取第四次吸液立即点样，点样后的计数板静置10s以上，置于显微镜置物台，显微观察孢子不移动即可开始计数。
计数原则：计上不计下，计左不计右。
3.3.2 计算方法
（1）每毫升清洗液中真菌孢子数计算公式：
x1=A×5×104=50000×A
x1——25个中方格规格计数板内的真菌孢子总数，单位为个每毫升（个/mL）；
A——计数室中5个中方格内真菌孢子总数，单位为个（个）。
（2）样品中真菌孢子数计算公式：
x2=x1×（30/10）
x1——25个中方格规格计数板内的真菌孢子总数，单位为个每毫升（个/mL）； x2——每克粮食样品中真菌孢子总数，单位为个每克（个/g）；
根据大量实验室和实仓研究，该方法对储粮真菌危害检测的结果，提出了一个初步的判定标准，共分四级。
3.4 监测结束时间
对连续两次均检测有真菌生长的点，即可确认此点为微生物生长点，记录真菌初期生长时间和粮食水分，监测即可结束。同时记录该点的CO2、温度、湿度等相关信息。
4 结果与分析
4.1 仓温与粮温变化情况（图1）
试验期间仓温与高水分粮粮温跟踪情况见图1。粮温与仓温均呈下降后上升趋势，粮温最高达28℃，最低为1.0℃；仓温最高为27.6℃，最低为-3.6℃。
4.2 实验起始与结束时间
高水分小麦模拟实仓实验从2012年11月1号开始，至2013年8月中旬结束。高水分玉米模拟实仓实验从2012年12月20号开始，至2013年8月中旬结束。
4.3 实验期间高水分粮真菌初生长时间（见表3）
4.4 经验总结
13.5%的小麦11月份入仓在本地区可以安全度夏；14.0%的小麦在本地区11月份入仓，气温为35.1℃，气湿为70.4%，仓温为24.5℃，仓湿为73.4%，粮温为21.4℃，检测到真菌生长，可安全储存270天左右；15.0%小麦低温情况下储存10天即长菌，不适合在本地区储存。
15.0%和15.5%高水分玉米在本地区自2012年12月20号入仓，气温为35.1℃，气湿为70.4%，仓温为24.5℃，仓湿为73.4%，粮温为21.4℃，检测到真菌生长，可安全储存230天左右。16.0%高水分玉米在本地区自2012年12月20号入仓，气温为26.1℃，气湿为75.1%，仓温为22.3℃，仓湿为73.4%，粮温为18.9℃，检测到真菌生长，可安全储存200天左右。
参考文献
[1]崔基方.粮食储藏技术[M].上海科学普及出版社，2001：72-84.
[2]程树峰，唐芳，武松陵.储粮真菌危害早期检测方法的研究[J].中国粮油学报，2011，26（4）.
[3]路茜玉.粮油储藏学.中国轻工业出版社.
[4]季青跃，于兆锋，李建智等.高水分玉米储藏试验[J].粮油食品科技，2006.