【摘 要】
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目的 探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及相关机制。方法 实时荧光定量PCR检测EDN3 m RNA在人结直肠癌组织及对应的癌旁组织
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院老年医学科,重庆市中医院乳腺甲状腺科,重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学重庆市重点实验室,
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目的 探讨内皮素3(endothelin 3,EDN3)基因对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响及相关机制。方法 实时荧光定量PCR检测EDN3 m RNA在人结直肠癌组织及对应的癌旁组织中的表达情况,半定量PCR检测EDN3及内皮素受体B(endothelin receptor B,EDNRB)m RNA在结直肠癌细胞(Ca CO2、Lo Vo、HT-29)中的表达情况。将包装过载体p CDH-CMV-MCS-EF1-Puro-EDN3的病毒感染至结直肠癌细胞Lo Vo,MTS法、克隆形成法、划痕法、Transwell法分析EDN3对细胞增殖、克隆、迁移和侵袭能力的改变。Western blot检测Lo Vo中p-ERK1/2和t-ERK1/2蛋白改变。结果 EDN3在人结直肠癌组织和细胞中表达降低。表达EDN3基因的重组载体成功感染至Lo Vo细胞。MTS和克隆实验结果显示实验组和对照组细胞增殖和克隆形成差异无统计学意义(P>0.05),划痕实验和Transwell实验提示实验组细胞迁移和侵袭能力明显低于对照组(P<0.01)。Western blot提示磷酸化的ERK1/2蛋白表达下降(P<0.01)。结论 EDN3在结直肠癌组织和细胞中表达降低,过表达EDN3能抑制结直肠癌细胞Lo Vo的迁移和侵袭能力,其机制可能与ERK1/2信号通路有关。
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