组织激肽释放酶6基因在人卵巢癌细胞中的表达与调控研究

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目的 探讨雌激素对其受体阳性人卵巢癌HO8910细胞中组织激肽释放酶6(KLK6)基因mRNA和蛋白表达的调控.方法 取对数生长期的HO8910细胞,在试验组分别加10-10、10-9、10-8、10-7mol/L的17-β雌二醇(17-βE2),对照组加无水乙醇,培养72 h.用实时荧光定量逆转录PCR检测各试验组和对照组中KLK6 mRNA表达.用流式细胞术检测KLK6编码的组织激肽释放酶6(hK6)蛋白表达.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术检测细胞增殖活力及增殖周期的变化.结果 17-βE2作用72 h后,各试验组(10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)HO8910细胞KLK6mRNA水平(3.83±0.41、4.14±0.49、6.26±0.38、7.28±1.82)和蛋白水平(10.62±0.35、10.89±0.12、11.88±0.28、12.07±0.15)均高于乙醇对照组(P<0.01).经MTT检测各试验组HO8910细胞光吸收度A值(0.771±0.015、0.849 ±0.022、0.858±0.016、0.895±0.031),与乙醇对照组(0.459±0.064)相比明显增加(P<0.01),细胞增殖活力明显增强;同时,经流式细胞技术检测,各试验组与乙醇对照组相比,其HO8910细胞G0/G1期百分率(67.72%、66.98%、66.31%、65.19%)呈下降趋势,S期(17.70%、18.27%、18.55%、19.11%)和G2/M期百分率(14.58%、14.75%、15.14%、15.70%)呈上升趋势.结论 17-βE2对KLK6 mRNA和蛋白的表达具有上调作用,同时能促进卵巢癌HO8910细胞的增殖。

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