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采用超高效液相色谱-串联质谱法建立了检测牛奶中糠氨酸含量的分析方法。试样经10.6 mol/L 盐酸水解，纯水稀释后，糠氨酸在C18色谱柱上以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相，进行液相色谱分离；质谱检测采用电喷雾正离子化模式和多反应监测模式（MRM）。结果表明，糠氨酸在0.01～0.5 mg/L范围内线性关系良好，相关系数(R2)为0.9996，定量限（LOQ）为0.5 mg/100g蛋白。在生牛乳空白样品中添加浓度为10，100，300 mg/100g蛋白时，糠氨酸的平均回收率为93.1%～95.7%，相对标准偏差（RSD）为1.2%～1.7%（n=6）。