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以人肝癌BEL-7402细胞免疫LOU/C大鼠,取其脾细胞与大鼠IR983F骨髓瘤细胞融合,获得稳定分泌抗人肝癌单克隆抗体3A5杂交瘤细胞株。ELISA交叉反应检测3A5对人肝癌BEL-7402、7721和Q3细胞皆呈强阳性,对人胚肺2BS细胞、人口腔鳞癌KB细胞和小鼠正常肝细胞等呈阴性。免疫电镜研究显示,肝癌细胞对单抗3A5胶体金颗粒的内化为44%,而KB细胞为18%;平均每个肝癌细胞含有金颗粒簇数为0.89,KB细胞为0.22,相差4倍。肝癌细胞对胶体金颗粒的内化能被预先加入的单抗3A5特异性地封闭。将单抗3A5与平阳霉素进行偶联,用克隆生成法观察偶联物和游离平阳霉素对肿瘤细胞的杀伤作用。当药物与细胞接触为1小时,单抗3A5与平阳霉素偶联物对肝癌细胞有选择性杀伤作用,按IC50比较,偶联物对靶细胞肝癌细胞的杀伤作用(IC50=0.0075μmol/L)比对非靶细胞KB细胞的作用(IC50=0.07μmol/L)约强100倍。偶联物对靶细胞的作用比游离平阳霉素(IC50=0.3μmol/L)约强50倍。